【產(chǎn)品基本信息和用途】

Seebio^? Hotstart Taq   DNA Polymerase是通過(guò)大腸桿菌重組表達(dá)獲得的經(jīng)過(guò)化學(xué)修飾的Taq DNA聚合酶，適用于Hotstart PCR。化學(xué)修飾消除了Taq酶在低溫條件下的聚合酶活性，在PCR擴(kuò)增過(guò)程中，95℃ 5min熱處理可消除這種修飾，恢復(fù)Taq酶活力，由此賦予了酶的熱啟動(dòng)活性。熱啟動(dòng)性能抑制了在低溫條件下由于引物非特異性退火或引物二聚體引起的非特異性擴(kuò)增。本品具有高靈敏特性，適用于基于DNA模板的PCR擴(kuò)增和檢測(cè)，包括細(xì)菌、質(zhì)粒DNA、cDNA以及復(fù)雜基因組DNA。

Seebio^? Hotstart Taq   DNA Polymerase保留了普通Taq DNA Polymerase的5'→3'核酸外切酶活性，可替代普通Taq酶的用途，例如qPCR、PCR等。

【產(chǎn)品特點(diǎn)和優(yōu)勢(shì)】

2  特異性和擴(kuò)增效率更高，可用更短循環(huán)數(shù)即可擴(kuò)增目的片段，同時(shí)降低背景

2  本酶可在更寬泛的Mg²⁺濃度范圍內(nèi)進(jìn)行高效擴(kuò)增，優(yōu)化擴(kuò)增條件更方便

2  可從高復(fù)雜模板中擴(kuò)增2kb靶基因，如人基因組DNA

2  本酶不含甘油，方便凍干等用途

【儲(chǔ)存緩沖液】

【10×反應(yīng)緩沖液】

100mM Tris HCl (pH 8.8 at 25°C), 500mM KCl, 15mM   MgCl₂, 1%Triton X-100

【推薦 PCR 條件】

     10×PCR   buffer                             2μl

     dNTP   Mix（2.5mM）                      1.6μl

       Hotstart Taq DNA polymerase                  1μl

     模板DNA                              < 500ng

     引物1                      0.2-1.0μM （終濃度）

     引物2                      0.2-1.0μM （終濃度）

     補(bǔ)充無(wú)菌純凈水至                          20μl

【推薦 PCR 程序】

95℃      5 min

95℃      20 sec   

50-68℃   30 sec       25~40 cycles 

72℃      1min/kb

72℃      5 min

                         4℃      storage

注意事項(xiàng)：建議冰上配制PCR反應(yīng)液；最佳PCR條件會(huì)隨著不同引物的熱力學(xué)性質(zhì)的差異而發(fā)生變化