本產(chǎn)品是重組型噬菌體T7 RNA聚合酶，來源于大腸桿菌。T7 RNA聚合酶能夠識別T7啟動子序列（5’-TAATACGACT CACTATAG*-3’），以雙鏈或單鏈DNA為模板，以NTP為底物，催化 5’→3’ 的RNA合成。線性質(zhì)粒、PCR產(chǎn)物均可用作體外合成RNA的模板。 

注：G*為 RNA 轉(zhuǎn)錄的首位堿基。

【產(chǎn)品特點(diǎn)和優(yōu)勢】

（1）5’→3’ RNA聚合酶活性

（2）可用于標(biāo)記或非標(biāo)記RNA的合成

（3）可接受生物素、地高辛、熒光蛋白標(biāo)記的核苷酸作為底物用于RNA的合成

【成分】

T7 RNA polymerase (50 U/μL) 

5×Transcription Buffer  1ml

【儲存緩沖液】

50mM Tris-HCl (pH 7.9)，100mM NaCl，10mM DTT，1mM EDTA，0.1% (v/v) Triton X-100和 50% (v/v) 甘油。

【5×反應(yīng)緩沖液】

200mM Tris-HCl (pH 7.9，25℃)，30mM MgCl2， 50mM DTT，50mM NaCl和10mM亞精胺。

【使用建議】

1、溶解在DEPC水（AAA0014B）中的線性DNA作為模板。

2、如下配置反應(yīng)混合液：

3、37℃撫育2h。

4、去除模板DNA，純化獲得轉(zhuǎn)錄出的RNA。

??【注意事項(xiàng)】??

1、操作及轉(zhuǎn)錄反應(yīng)應(yīng)在RNase-free環(huán)境下進(jìn)行，建議戴手套，反應(yīng)體系內(nèi)加入RNase抑制劑等防止RNA被降解。

2、 當(dāng)轉(zhuǎn)錄長度< 100nt時，模板量可增加至2μg。

3、為避免低溫條件下DNA和亞精胺結(jié)合形成沉淀，反應(yīng)混合物應(yīng)在室溫下制備。

4、反應(yīng)混合物可按比例放大或縮小。

【運(yùn)輸、儲存條件和有效期】

干冰運(yùn)輸。-20℃保存，有效期兩年。