耐熱無(wú)機(jī)焦磷酸酶
- 別名：Pyrophosphatase, Inorganic (yeast)
- 編碼：EAE0034C
- 級(jí)別：GMP Grade
- 簡(jiǎn)介：大體系體外轉(zhuǎn)錄mRNA 過(guò)程中，不可避免的會(huì)產(chǎn)生無(wú)機(jī)焦磷酸鹽，這些物質(zhì)對(duì)轉(zhuǎn)錄造成了極大的抑制作用，無(wú)機(jī)焦磷酸酶（ PPase ）可以水解核酸擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)中產(chǎn)生的無(wú)機(jī)焦磷酸鹽，促進(jìn)反應(yīng)平衡向產(chǎn)物生成端平移，增加產(chǎn)物的量。
基礎(chǔ)信息
| 來(lái)源 | 酵母來(lái)源 |
| 級(jí)別 | GMP Grade |
| 應(yīng)用 | 水解核酸擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)中產(chǎn)生的無(wú)機(jī)焦磷酸鹽 |
產(chǎn)品介紹
產(chǎn)品描述:
大體系體外轉(zhuǎn)錄mRNA 過(guò)程中，不可避免的會(huì)產(chǎn)生無(wú)機(jī)焦磷酸鹽，這些物質(zhì)對(duì)轉(zhuǎn)錄造成了壓抑作用，無(wú)機(jī)焦磷酸酶（ PPase ）可以水解核酸擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)中產(chǎn)生的無(wú)機(jī)焦磷酸鹽，促進(jìn)反應(yīng)平衡向產(chǎn)物生成端平移，增加產(chǎn)物的量。
PPase（Pyrophosphatase, Inorganic，無(wú)機(jī)焦磷酸酶）的分子量約為 63kD，可催化無(wú)機(jī)焦磷酸鹽水解生成正磷酸鹽：P2O7-4+H2O+PPase→2HPO4-2。在核酸擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)中，PPase 可水解隨著反應(yīng)生成的無(wú)機(jī)焦磷酸鹽，避免其對(duì)反應(yīng)體系的壓抑。焦磷酸鹽的去除可使反應(yīng)平衡向產(chǎn)物生成端平移。
本制品為利用大腸桿菌大規(guī)模發(fā)酵表達(dá)的 GMP 級(jí)重組無(wú)機(jī)焦磷酸酶（酵母來(lái)源），采用醫(yī)藥級(jí)原輔料生產(chǎn)，并嚴(yán)格控制宿主蛋白質(zhì)殘留、核酸殘留等，符合 GMP 規(guī)范的產(chǎn)品生產(chǎn)與質(zhì)量管理規(guī)程保障生產(chǎn)過(guò)程及所有原輔料可追溯。
遵循以下規(guī)范生產(chǎn)：
ISO 9001:2015, certified facility
USP Chapter <1043>, Ancillary Materials for Cell, Gene, and Tissue-Engineered Products
USP Chapter <92>, Growth Factors and Cytokines Used in Cell Therapy Manufacturing
Ph. Eur. General Chapter 5.2.12, Raw Materials of Biological Origin for the Production of Cell-based and Gene Therapy Medicinal Products
產(chǎn)品特點(diǎn)：
1. 水解無(wú)機(jī)焦磷酸鹽。
2. DNA 合成：明顯增強(qiáng) DNA 復(fù)制能力。
3. RNA 合成：體外轉(zhuǎn)錄反應(yīng)中提高 RNA 產(chǎn)量。
4. 熱穩(wěn)定性：適宜反應(yīng)溫度為 25℃，65℃ 10min 可使該酶失活。
2. DNA 合成：明顯增強(qiáng) DNA 復(fù)制能力。
3. RNA 合成：體外轉(zhuǎn)錄反應(yīng)中提高 RNA 產(chǎn)量。
4. 熱穩(wěn)定性：適宜反應(yīng)溫度為 25℃，65℃ 10min 可使該酶失活。
產(chǎn)品用途：
1. 優(yōu)化 RNA 轉(zhuǎn)錄：提高體外轉(zhuǎn)錄反應(yīng)的 RNA 產(chǎn)量。
2. 優(yōu)化 PCR 反應(yīng)：增加 DNA 產(chǎn)量。
3. 去除利用焦磷酸鹽測(cè)定法來(lái)進(jìn)行 SNP 基因分型的試劑中的 PPi 污染物。
4. 促進(jìn)蛋白質(zhì)、RNA 和 DNA 的合成。
5. 催化 PPi + H2O→2Pi 的反應(yīng)。
2. 優(yōu)化 PCR 反應(yīng)：增加 DNA 產(chǎn)量。
3. 去除利用焦磷酸鹽測(cè)定法來(lái)進(jìn)行 SNP 基因分型的試劑中的 PPi 污染物。
4. 促進(jìn)蛋白質(zhì)、RNA 和 DNA 的合成。
5. 催化 PPi + H2O→2Pi 的反應(yīng)。
活性定義：
標(biāo)準(zhǔn)反應(yīng)條件下每分鐘催化無(wú)機(jī)焦磷酸鹽生成 1 μmol 磷酸鹽所需的酶量定義為 1 個(gè)活性單位。
保存體系：
20 mM Tris-HCl; 100 mM NaCl; 1 mM DTT; 0.1 mM EDTA; 50% (v/v) Glycerol; pH 8.0。
保存溫度：
-20±5 ℃。
注意事項(xiàng)：
1. 該酶在多種反應(yīng) Buffer 中具有活性，通常該酶在 HDA、LAMP 等實(shí)驗(yàn)中，直接加入即可。
2. 該酶的用量在不同的實(shí)驗(yàn)中需要優(yōu)化，通常在 0.05~1U/ml 濃度調(diào)整。
3. 該酶的適宜反應(yīng)溫度為 25℃，其在 16~37℃有活性，65℃ 10min 可使該酶失活。
4. 輔因子：Mg2+對(duì)于酶發(fā)揮活性是必須的。
2. 該酶的用量在不同的實(shí)驗(yàn)中需要優(yōu)化，通常在 0.05~1U/ml 濃度調(diào)整。
3. 該酶的適宜反應(yīng)溫度為 25℃，其在 16~37℃有活性，65℃ 10min 可使該酶失活。
4. 輔因子：Mg2+對(duì)于酶發(fā)揮活性是必須的。
質(zhì)量指標(biāo)
MSDS
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