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人鼠嵌合抗體表達(dá)

發(fā)布時(shí)間:2021-06-09 點(diǎn)擊數(shù):1223
基因工程抗體的發(fā)展極大地推動(dòng)了抗體技術(shù)的進(jìn)步以及抗體藥物和診斷試劑的研發(fā)。制備基因工程抗體涉及一整套步驟,包括基因克隆、載體構(gòu)建、表達(dá)篩選、抗體制備和親和力測(cè)定等。西寶生物提供技術(shù)支持,以協(xié)助您成功進(jìn)行基因工程抗體的制備過程。
通過先進(jìn)的技術(shù)平臺(tái)和專業(yè)的技術(shù)人員,西寶生物能夠?qū)⒛氖笤磫慰寺】贵w進(jìn)行人源嵌合化改造,或者將您的小分子抗體進(jìn)行全長(zhǎng)改造。利用DNA重組技術(shù),西寶生物可以將鼠單抗的輕鏈和重鏈可變區(qū)基因插入含有人抗體恒定區(qū)的表達(dá)載體中,然后將其轉(zhuǎn)化為哺乳動(dòng)物細(xì)胞,從而制備出人鼠嵌合抗體。這些嵌合抗體的人源化程度可達(dá)到約70%,充分保留了異源單抗的可變區(qū),較大限度地保持了其親和性,并降低了免疫原性。
嵌合單克隆抗體的定義與原理
嵌合抗體是將一個(gè)物種(如小鼠)的可變區(qū)與另一個(gè)物種(如人類)的恒定區(qū)結(jié)合而形成的結(jié)構(gòu)性嵌合體。它是開發(fā)治療性單克隆抗體時(shí)降低免疫原性、延長(zhǎng)血清半衰期的重要步驟。通過將一個(gè)物種的恒定區(qū)替換為另一個(gè)物種的恒定區(qū),甚至在同一物種內(nèi)將一個(gè)亞型替換為另一個(gè)亞型,可以實(shí)現(xiàn)抗體的人源化。然而,這個(gè)過程可能具有挑戰(zhàn)性。
西寶生物提供嵌合抗體的構(gòu)建和生產(chǎn)服務(wù),涵蓋人、小鼠、兔、大鼠、犬等多種物種。您只需提供抗體全長(zhǎng)序列或可變區(qū)基因序列,我們將為您交付高質(zhì)量的嵌合抗體。隨時(shí)歡迎咨詢,西寶生物的技術(shù)專家將為您提供支持。
嵌合抗體制備過程與應(yīng)用
制備人-鼠嵌合單克隆抗體
如何制備人-鼠嵌合單克隆抗體
服務(wù)內(nèi)容
嵌合抗體是通過基因工程技術(shù)制備的,即將選定的小鼠雜交瘤免疫球蛋白(Ig)的可變區(qū)與人Ig的恒定區(qū)連接起來,構(gòu)建嵌合抗體。制備過程包括以下步驟:
1.收集小鼠脾臟并分離B細(xì)胞。
2.融合B細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞,形成雜交瘤細(xì)胞,篩選出抗原特異性IgG陽(yáng)性克隆。
3.分離小鼠VH和VL的DNA序列,以及人免疫球蛋白恒定區(qū)的DNA序列。
4.通過基因工程構(gòu)建小鼠/人嵌合基因,將其轉(zhuǎn)染至哺乳動(dòng)物細(xì)胞。
5.選擇高表達(dá)嵌合IgG的克隆,并從培養(yǎng)上清液中純化IgG。
嵌合抗體在治療和免疫測(cè)定中具有重要應(yīng)用。在免疫組織化學(xué)或ELISA等檢測(cè)中,通過轉(zhuǎn)換抗體恒定區(qū)以匹配宿主或二抗的物種,可以顯著降低背景染色等問題。
服務(wù)信息
電話: 400-021-8158
 

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