【產(chǎn)品描述】

PEI是一種高電荷陽離子聚合物，易結合負電荷的核酸分子形成復合物，由此介導核酸進入細胞中。PEI用于核酸轉染具有高效、成本低、穩(wěn)定等特點，適用于HEK293、CHO等多種細胞系的瞬時轉染或穩(wěn)定轉染。本產(chǎn)品分子量為40,000Da，外觀為白色至灰白色固體。

【使用方法】

• l   溶解配制

1. 將10mg PEI 粉末加入8ml超純化水中，用2N鹽酸調(diào)節(jié)pH至3.0±0.1，72℃攪拌溶解（約5min）；

2. 用2N氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)pH為7.0±0.1，加水定容至10ml；

3. 用0.1~0.2um無菌過濾器過濾除菌，即得到1mg/ml的儲存液；

4. 分裝并儲存在4℃，3個月內(nèi)穩(wěn)定；-20℃長期儲存，有效期1年，避免反復凍融。

l  細胞轉染

1. 轉染前一天鋪板細胞，以轉染時細胞匯合度到70%-80%為宜，并更換成新鮮的完全培養(yǎng)液；

2. 準備DNA-PEI復合物：用不含血清的培養(yǎng)基稀釋DNA至濃度為20ng/ul，取適量PEI加入DNA溶液中（建議DNA和PEI的質(zhì)量比控制在1:1~1:3），室溫孵育15-30min，形成DNA-PEI復合物。

3. 直接將DNA-PEI 復合物加入細胞中，輕輕混勻，繼續(xù)培養(yǎng)4h-6h后更換含血清的培養(yǎng)基。

4. 對于瞬時轉染，通常在轉染后24-48小時后檢測產(chǎn)物表達；對于穩(wěn)定轉染，12-24小時后傳代并進一步通過篩選培養(yǎng)基培培養(yǎng)獲得穩(wěn)定整合的細胞克隆。

【參考用量】

針對不同培養(yǎng)皿，您可以參考下表制備轉染復合物，但最佳轉染條件往往需要更多比例的測試。

【注意事項】

本產(chǎn)品僅限于科學研究用，不得用于食品或藥品。請穿著實驗服并穿戴一次性手套操作。